不懂选购CD133抗体?这篇文章让你瞬间掌握技巧!
CD133(也称为PROM1)是一种细胞表面糖蛋白,广泛应用于干细胞和癌症研究。作为常用的表面标记物,它被用于识别具有干细胞样特征的癌细胞,但其表达不仅限于肿瘤细胞,还存在于多种正常组织的分化细胞和干/祖细胞中。
CD133参与多种关键的细胞过程,例如在癌症中经常失调的信号通路:PI3K/Akt 和 Wnt/β-连环蛋白途径。它的表达与癌症应激条件下增强的细胞自我更新、迁移、侵袭和存活密切相关。内在和外在因素共同调节CD133的表达,包括细胞本身的机制以及来自微环境的影响。细胞中增强的CD133表达通过特定信号通路的激活,能够赋予适应性优势,从而在癌症发生、发展以及肿瘤耐药性中起到重要作用。

Fig 1.The central role of CD133 in regulating various cellular processes within the microenvironment.
CD133抗原表位与克隆号选择:
克隆号AC133,识别表位CD133/1,糖基化表位,通常与干细胞表型密切相关;
用于从外周血、骨髓、脐带血及其他组织中分选CD133⁺细胞,广泛应用于干细胞、癌症干细胞的流式细胞术(FACS)分析和磁珠分选(如MACS系统);
适合分析或分选CD133⁺细胞,特别是在干细胞和癌症干细胞的分选中表现优异。
克隆号293C3,识别表位CD133/2,可能不具有糖基化修饰的表位;
主要用于流式细胞术染色,特别是分选后用于荧光染色和细胞分型分析;
在分选后的CD133⁺细胞检测中应用,提供较高的信号亮度和稳定性。
克隆号AC141,识别表位CD133/2,可能不具有糖基化修饰的表位;
与293C3类似,主要用于流式细胞术染色及分型分析;
适合需要区分CD133/2表位的实验,特别在特定癌症细胞和干细胞亚群中表现良好。
选择CD133抗体克隆号时需要考虑的因素
- 研究目的:如果目标是分选CD133⁺细胞,尤其是从外周血或骨髓中分选时,克隆AC133是优选。其针对CD133/1糖基化表位的结合特性使其能够在分选过程中提供更好的特异性。如果研究目的是在分选后对CD133⁺细胞进行进一步分析,如荧光染色和表型检测,则可以选择293C3或AC141来标记CD133/2表位的细胞。
- 疾病模型与表达差异:在某些疾病(如骨髓增生异常综合征和某些急性髓性白血病)中,CD133/1和CD133/2的表达强度可能有所不同。例如,在某些白血病亚型中,CD133/1的表达可能较CD133/2更为显著。这种表达差异可能受疾病状态、微环境或治疗策略的影响。因此,在针对这类模型的实验中,需要仔细评估两种表位的表达水平,以选择合适的抗体克隆号。
- 表位特异性与结合特性:CD133的表位1(CD133/1)为糖基化表位,而表位2(CD133/2)可能不具有糖基化修饰。这种结构上的差异可能导致两种表位在不同细胞类型或疾病状态下的抗体结合效果不同。表位1在糖基化程度高的细胞(如某些肿瘤干细胞)中更容易被识别,而表位2则更易在某些糖基化程度较低的细胞群中表现出良好的结合效果。因此,在实验设计中应综合考虑细胞的表型特征和目标表位的修饰情况,以确保抗体的最佳结合效果。
在选择CD133抗体克隆号时,应根据实验的具体需求和研究目标来做出决策。AC133抗体因其识别CD133/1表位的特性,非常适合用于CD133⁺细胞的分选和流式分析;而293C3和AC141则因其识别CD133/2表位的特性,更适合用于分选后细胞的进一步分析和染色。此外,在选择抗体时,还应考虑特定疾病状态下CD133两个表位的表达水平差异,以及抗体与表位结合时可能受到的糖基化修饰影响。了解不同克隆号的表位特性和应用场景,将有助于研究人员在实验中取得更精准的结果。
CD133/PROM1抗体产品:
Catalog No Product Name
RHA68402 Anti-Human Glycosylated CD133/PROM1 Antibody (AC133/1)
FHA68412 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050), PE
FHA68422 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409), PE
FHA68414 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050), PerCP
FHA68424 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409), PerCP
FHA68413 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050), APC
FHA68423 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409), APC
FHA68411 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050), FITC
FHA68421 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409), FITC
FHA68420 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0409)
FHA68410 Anti-Human CD133/PROM1 Antibody (SAA0050)
参考文献
- Yin AH, Miraglia S, Zanjani ED, Almeida-Porada G, Ogawa M, Leary AG, Olweus J, Kearney J, Buck DW. AC133, a novel marker for human hematopoietic stem and progenitor cells. Blood, 1997; 90(12): 5002-5012.
- Uchida N, Buck DW, He D, Reitsma MJ, Masek M, Phan TV, Tsukamoto AS, Gage FH, Weissman IL. Direct isolation of human central nervous system stem cells. Proc Natl Acad Sci USA, 2000; 97(26): 14720-14725.
- Miraglia S, Godfrey W, Yin AH, Atkins K, Warnke R, Holden JT, Bray RA, Waller EK, Buck DW. A novel five-transmembrane hematopoietic stem cell antigen: isolation, characterization, and molecular cloning. Proc Natl Acad Sci USA, 1997; 94(25): 14792-14797.
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